寡核苷酸全生命周期：SGS為其質量控制“保駕護航”

2025年9月8日，國家藥監局發布了《化學合成寡核苷酸藥物（創新藥）藥學研究技術指導原則（征求意見稿）》（以下稱“征求意見稿”），明確化學合成寡核苷酸藥物的生產工藝、雜質評估（如起始物料降解產物）及穩定性研究要求，強調需結合ICH Q11（原料藥開發）原則進行質量控制，適用于創新藥申報。本“征求意見稿”的發布，既填補了國內寡核苷酸藥物藥學研究的法規空白，也標志著我國對寡核苷酸藥物的研發與審評進入了標準化、精細化的新階段。

一、初識寡核苷酸：寡核苷酸是什么？為何重要？

定義：寡核苷酸（Oligonucleotides）是由十幾個到幾十個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接而成的短鏈DNA或RNA分子。它不像DNA那樣承載遺傳信息，也不像RNA那樣進行基因表達表達，而是作為一種“精準制導”的工具，通過堿基互補配對原理，靶向特定的mRNA或DNA，從而“調控”基因表達。寡核苷酸大致有以下幾類：反義寡核苷酸（Antisense Oligonucleotides, ASOs）、小干擾RNA（siRNA, miRNA）和核酸適配體（Aptamers）等，在罕見病治療、心血管疾病、中樞神經系統疾病、代謝性疾病、抗病毒/抗菌、腫瘤免疫療法、基因編輯等領域廣泛應用，是生物醫藥領域的關鍵增長點和顛覆性技術。

市場與法規背景：隨著ASOs（反義寡核苷酸）、siRNA（小干擾RNA）等藥物成功上市，寡核苷酸已成為繼小分子、抗體藥之后的第三大藥物門類。市場飛速增長，法規監管力度順勢加強。

北美市場聚焦臨床階段合規性檢測，特別是FDA指南要求的QTc延長風險評估，該區市場對檢測的合規性和準確性要求極高，為精準檢測的業務提供了廣闊的市場空間；歐洲市場相應出臺EMA新規，特別是2024年發布的《寡核苷酸治療的非臨床安全性評估》草案，該區市場對法規的響應速度和檢測技術的創新性要求較高，為檢測業務帶來了新的機遇；亞太市場存在工藝開發外包檢測的機會，包括合成工藝優化和成本控制方案，該區域市場對檢測服務的需求增長迅速，為檢測企業提供了豐富的業務機會。

二、《化學合成寡核苷酸藥物（創新藥）藥學研究技術指導原則（征求意見稿）》帶來的機遇與挑戰

“征求意見稿”為行業樹立了清晰的標桿：

強調“質量源于設計（QbD）”：要求從研發伊始就全面考慮產品質量，而非最終檢驗。

明確“全過程控制”：對從起始物料到成品的全過程提出了詳盡的控制要求，特別是對工藝相關雜質（如失敗序列、修飾雜質）和產品相關雜質（如降解產物）的研究深度要求更高。

細化“質量研究與放行”：對鑒別、純度、含量、生物學活性等檢測項目的可接受標準和所用方法提供了具體指導。

關注“穩定性”：要求基于產品特性科學設計穩定性研究方案。

對市場的影響：

挑戰：提高了行業技術壁壘。研發企業必須投入更多資源在藥學研究上，對分析檢測的能力和要求空前提高。不規范的小型企業將面臨淘汰風險。

機遇：為高質量、高標準的研發和生產企業鋪平了道路，有利于優質產品脫穎而出。同時，極大地催生了對高端分析檢測服務的需求。

三、全生命周期解析：從“生產”到“上市”的質控環節

寡核苷酸藥物的黃金時代已經到來，而嚴格的質量控制是其成功的基石。

寡核苷酸的生命周期可分為研發、生產、放行、上市后四個階段。每個階段都對質量控制提出了嚴苛要求。

1. 研發與工藝開發階段

核心任務：序列設計、合成工藝摸索與純化方法開發。

質控與檢測需求：

序列確認：確保合成的序列與設計一致。

純度分析：檢測目標產物與失敗序列（N-1，N-2等）、缺失序列等雜質的比例。

儀器設備：質譜儀（MS，尤其是高分辨質譜HRMS）和離子對反相高效液相色譜（IP-RP-HPLC）。

2. 規模化生產階段

核心任務：固相合成（脫保護、偶聯、氧化或硫代、加帽）、純化、濃縮與置換。

質控與檢測需求：

過程控制（IPC）：在合成過程中實時監測關鍵步驟，確保反應完全。

純化監控：確保純化步驟能有效去除雜質。

儀器設備：高效液相色譜（HPLC）、紫外分光光度計（用于濃度測定）。

3. 成品放行與表征階段

核心任務：確保每一批產品都符合預設的質量標準。

質控與檢測需求：這是最復雜、最全面的環節，也是 “征求意見稿”重點強調的部分。

鑒別：通過分子量（Q-TOF或QE）、保留時間、紅外、圓二色譜法、熱分析、核磁、序列確認、末端結構分析等鑒別方法確保寡核苷酸的分子結構和理化性質準確無誤。

純度：通過對全長產物比例（IP-RP-HPLC）、雜質譜（AX-HPLC、RP-HPLC）、有關物質檢查（HPLC法）、殘留雜質檢測（GC/GC-MS）等項目的檢測，評估寡核苷酸的純度，確保其符合藥用標準。

安全性：通過考察無菌、內毒素、生物負載、可見異物、殘留溶劑（HS-GC）和元素雜質（ICP）等項目，確保終產品在使用過程中不會對患者造成額外的安全風險。

其他：外觀、pH值、水分等需符合產品質量要求。

4. 上市后監測階段

核心任務：持續監測產品穩定性，確保在有效期內質量穩定。

質控與檢測需求：長期和加速穩定性試驗。

穩定性：通過加速試驗分析降解路徑，評估寡核苷酸在儲存和使用過程中的穩定性，保證包括pH、水分、以及標準中列出的測試項目在內的所有參數指標在均合格范圍內。

SGS擁有完備的儀器平臺：質譜（QTOF & QE & MS/MS）、高效液相色譜（HPLC）、超高效液相色譜（UPLC）、毛細管電泳儀（CE）、圓二色光譜儀（CD）、紅外（FT-IR）、核磁（NMR）、酶標儀、RT-qPCR/qPCR 等高精尖儀器設備，全面覆蓋寡核苷酸從序列確證到雜質解析、從含量測定到穩定性研究的全流程檢測需求。

擁有經驗豐富的團隊：SGS生命科學實驗室遵循各國藥典指導原則和ICH等指導原則，致力于在寡核苷酸類藥物領域搭建完備的技術平臺并提供全面解決方案。我們對不同地區的監管要求，均可以進行符合要求的方法確認；可以根據客戶的實際需求，針對性地開發分析方法、進行方法學驗證及方法轉移，為企業產品從研發到申報提供一站式解決方案。

擁有權威的資質認證：我們的實驗室符合GMP標準，并在2024年，以“零缺陷”的成績順利通過美國FDA審計，能夠確保數據的合規性與可靠性。