寡核苷酸全生命周期：SGS為其質(zhì)量控制“保駕護航”

2025年9月8日，國家藥監(jiān)局發(fā)布了《化學(xué)合成寡核苷酸藥物（創(chuàng)新藥）藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）》（以下稱“征求意見稿”），明確化學(xué)合成寡核苷酸藥物的生產(chǎn)工藝、雜質(zhì)評估（如起始物料降解產(chǎn)物）及穩(wěn)定性研究要求，強調(diào)需結(jié)合ICH Q11（原料藥開發(fā)）原則進(jìn)行質(zhì)量控制，適用于創(chuàng)新藥申報。本“征求意見稿”的發(fā)布，既填補了國內(nèi)寡核苷酸藥物藥學(xué)研究的法規(guī)空白，也標(biāo)志著我國對寡核苷酸藥物的研發(fā)與審評進(jìn)入了標(biāo)準(zhǔn)化、精細(xì)化的新階段。

一、初識寡核苷酸：寡核苷酸是什么？為何重要？

定義：寡核苷酸（Oligonucleotides）是由十幾個到幾十個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接而成的短鏈DNA或RNA分子。它不像DNA那樣承載遺傳信息，也不像RNA那樣進(jìn)行基因表達(dá)表達(dá)，而是作為一種“精準(zhǔn)制導(dǎo)”的工具，通過堿基互補配對原理，靶向特定的mRNA或DNA，從而“調(diào)控”基因表達(dá)。寡核苷酸大致有以下幾類：反義寡核苷酸（Antisense Oligonucleotides, ASOs）、小干擾RNA（siRNA, miRNA）和核酸適配體（Aptamers）等，在罕見病治療、心血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、代謝性疾病、抗病毒/抗菌、腫瘤免疫療法、基因編輯等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，是生物醫(yī)藥領(lǐng)域的關(guān)鍵增長點和顛覆性技術(shù)。

市場與法規(guī)背景：隨著ASOs（反義寡核苷酸）、siRNA（小干擾RNA）等藥物成功上市，寡核苷酸已成為繼小分子、抗體藥之后的第三大藥物門類。市場飛速增長，法規(guī)監(jiān)管力度順勢加強。

北美市場聚焦臨床階段合規(guī)性檢測，特別是FDA指南要求的QTc延長風(fēng)險評估，該區(qū)市場對檢測的合規(guī)性和準(zhǔn)確性要求極高，為精準(zhǔn)檢測的業(yè)務(wù)提供了廣闊的市場空間；歐洲市場相應(yīng)出臺EMA新規(guī)，特別是2024年發(fā)布的《寡核苷酸治療的非臨床安全性評估》草案，該區(qū)市場對法規(guī)的響應(yīng)速度和檢測技術(shù)的創(chuàng)新性要求較高，為檢測業(yè)務(wù)帶來了新的機遇；亞太市場存在工藝開發(fā)外包檢測的機會，包括合成工藝優(yōu)化和成本控制方案，該區(qū)域市場對檢測服務(wù)的需求增長迅速，為檢測企業(yè)提供了豐富的業(yè)務(wù)機會。

二、《化學(xué)合成寡核苷酸藥物（創(chuàng)新藥）藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）》帶來的機遇與挑戰(zhàn)

“征求意見稿”為行業(yè)樹立了清晰的標(biāo)桿：

強調(diào)“質(zhì)量源于設(shè)計（QbD）”：要求從研發(fā)伊始就全面考慮產(chǎn)品質(zhì)量，而非最終檢驗。

明確“全過程控制”：對從起始物料到成品的全過程提出了詳盡的控制要求，特別是對工藝相關(guān)雜質(zhì)（如失敗序列、修飾雜質(zhì)）和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)（如降解產(chǎn)物）的研究深度要求更高。

細(xì)化“質(zhì)量研究與放行”：對鑒別、純度、含量、生物學(xué)活性等檢測項目的可接受標(biāo)準(zhǔn)和所用方法提供了具體指導(dǎo)。

關(guān)注“穩(wěn)定性”：要求基于產(chǎn)品特性科學(xué)設(shè)計穩(wěn)定性研究方案。

對市場的影響：

挑戰(zhàn)：提高了行業(yè)技術(shù)壁壘。研發(fā)企業(yè)必須投入更多資源在藥學(xué)研究上，對分析檢測的能力和要求空前提高。不規(guī)范的小型企業(yè)將面臨淘汰風(fēng)險。

機遇：為高質(zhì)量、高標(biāo)準(zhǔn)的研發(fā)和生產(chǎn)企業(yè)鋪平了道路，有利于優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品脫穎而出。同時，極大地催生了對高端分析檢測服務(wù)的需求。

三、全生命周期解析：從“生產(chǎn)”到“上市”的質(zhì)控環(huán)節(jié)

寡核苷酸藥物的黃金時代已經(jīng)到來，而嚴(yán)格的質(zhì)量控制是其成功的基石。

寡核苷酸的生命周期可分為研發(fā)、生產(chǎn)、放行、上市后四個階段。每個階段都對質(zhì)量控制提出了嚴(yán)苛要求。

1. 研發(fā)與工藝開發(fā)階段

核心任務(wù)：序列設(shè)計、合成工藝摸索與純化方法開發(fā)。

質(zhì)控與檢測需求：

序列確認(rèn)：確保合成的序列與設(shè)計一致。

純度分析：檢測目標(biāo)產(chǎn)物與失敗序列（N-1，N-2等）、缺失序列等雜質(zhì)的比例。

儀器設(shè)備：質(zhì)譜儀（MS，尤其是高分辨質(zhì)譜HRMS）和離子對反相高效液相色譜（IP-RP-HPLC）。

2. 規(guī)模化生產(chǎn)階段

核心任務(wù)：固相合成（脫保護、偶聯(lián)、氧化或硫代、加帽）、純化、濃縮與置換。

質(zhì)控與檢測需求：

過程控制（IPC）：在合成過程中實時監(jiān)測關(guān)鍵步驟，確保反應(yīng)完全。

純化監(jiān)控：確保純化步驟能有效去除雜質(zhì)。

儀器設(shè)備：高效液相色譜（HPLC）、紫外分光光度計（用于濃度測定）。

3. 成品放行與表征階段

核心任務(wù)：確保每一批產(chǎn)品都符合預(yù)設(shè)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

質(zhì)控與檢測需求：這是最復(fù)雜、最全面的環(huán)節(jié)，也是 “征求意見稿”重點強調(diào)的部分。

鑒別：通過分子量（Q-TOF或QE）、保留時間、紅外、圓二色譜法、熱分析、核磁、序列確認(rèn)、末端結(jié)構(gòu)分析等鑒別方法確保寡核苷酸的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)準(zhǔn)確無誤。

純度：通過對全長產(chǎn)物比例（IP-RP-HPLC）、雜質(zhì)譜（AX-HPLC、RP-HPLC）、有關(guān)物質(zhì)檢查（HPLC法）、殘留雜質(zhì)檢測（GC/GC-MS）等項目的檢測，評估寡核苷酸的純度，確保其符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。

安全性：通過考察無菌、內(nèi)毒素、生物負(fù)載、可見異物、殘留溶劑（HS-GC）和元素雜質(zhì)（ICP）等項目，確保終產(chǎn)品在使用過程中不會對患者造成額外的安全風(fēng)險。

其他：外觀、pH值、水分等需符合產(chǎn)品質(zhì)量要求。

4. 上市后監(jiān)測階段

核心任務(wù)：持續(xù)監(jiān)測產(chǎn)品穩(wěn)定性，確保在有效期內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定。

質(zhì)控與檢測需求：長期和加速穩(wěn)定性試驗。

穩(wěn)定性：通過加速試驗分析降解路徑，評估寡核苷酸在儲存和使用過程中的穩(wěn)定性，保證包括pH、水分、以及標(biāo)準(zhǔn)中列出的測試項目在內(nèi)的所有參數(shù)指標(biāo)在均合格范圍內(nèi)。

SGS擁有完備的儀器平臺：質(zhì)譜（QTOF & QE & MS/MS）、高效液相色譜（HPLC）、超高效液相色譜（UPLC）、毛細(xì)管電泳儀（CE）、圓二色光譜儀（CD）、紅外（FT-IR）、核磁（NMR）、酶標(biāo)儀、RT-qPCR/qPCR 等高精尖儀器設(shè)備，全面覆蓋寡核苷酸從序列確證到雜質(zhì)解析、從含量測定到穩(wěn)定性研究的全流程檢測需求。

擁有經(jīng)驗豐富的團隊：SGS生命科學(xué)實驗室遵循各國藥典指導(dǎo)原則和ICH等指導(dǎo)原則，致力于在寡核苷酸類藥物領(lǐng)域搭建完備的技術(shù)平臺并提供全面解決方案。我們對不同地區(qū)的監(jiān)管要求，均可以進(jìn)行符合要求的方法確認(rèn)；可以根據(jù)客戶的實際需求，針對性地開發(fā)分析方法、進(jìn)行方法學(xué)驗證及方法轉(zhuǎn)移，為企業(yè)產(chǎn)品從研發(fā)到申報提供一站式解決方案。

擁有權(quán)威的資質(zhì)認(rèn)證：我們的實驗室符合GMP標(biāo)準(zhǔn)，并在2024年，以“零缺陷”的成績順利通過美國FDA審計，能夠確保數(shù)據(jù)的合規(guī)性與可靠性。